Влияние монокомпонентов вакцины против вирусной диареи, рота-, коронавирусной инфекции, эшерихиоза и протеоза «Энтеровак-5» на иммунный ответ у телят

При современных условиях ведения животноводства инфекции желудочно-кишечного тракта приобретает в последнее время чрезвычайную актуальность в связи с возрастающей частотой выявления этой патологии.

В этиологической структуре возбудители, вызывающих патологию желудочно-кишечного тракта у телят, основную роль играют вирус диареи, рота-, коронавирусы, патогенные штаммы E.coli, протей и др., а также их ассоциации. Особенностью вирусно-бактериальных желудочно-кишечных болезней является их двухфазное течение. В первую, вирусную фазу, отмечается активизация репродукции вирусов в чувствительных клетках желудочно-кишечного тракта, приводящая к их поражению, угнетению иммунной системы и обмена веществ. Во вторую, бактериальную фазу, происходит активизация бактерий, которые начинают массово размножаться на пораженных клетках желудочно-кишечного тракта на фоне угнетения иммунной системы.

Кроме того, взаимодействие вирусов и бактерий на фоне стресс-факторов и пониженной резистентности организма телят, приводит к развитию тяжело протекающих гастроэнтеритов, сопровождающихся значительным отходом животных. Воздействие нескольких инфекционных агентов на организм животного является чрезвычайно сложным новым процессом, который не может быть выражен простым суммированием признаков, характерных для каждой из составляющих его моноинфекций.

Существующие в настоящее время средства специфической профилактики базируются, в основном, на применении моновакцин для иммунизации глубокоcтельных коров с целью создания у новорожденных телят колострального иммунитета. Кроме того, применение моновакцин не позволяет формировать иммунитет против нескольких возбудителей желудочнокишечных заболеваний.

Для специфической профилактики таких ассоциированных инфекций трудно бороться только классическими методами, поэтому для профилактики таких болезней должны быть разработаны поливалентные вакцины, с функционально синергическим действием как вирусных, так и бактериальных компонентов.

Цель настоящей работы – изучение антигенной активности монокомпонентов при конструировании инактивированной поливалентной вакцины против вирусной диареи, рота-, коронавирусной инфекции, эшерихиоза и протеоза телят «Энтеровак-5» в зависимости от способа инактивации на телятах.

Исследования проводились в условиях научной лаборатории кафедры эпизоотологии и инфекционных болезней УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» и клиники кафедры и КСУП «Улищицы-агро» Витебской области.

Объектом для исследования являлись телята их сыворотка крови.

Вирусы диареи и коронавирусы накапливали на перевиваемой культуре клеток почки теленка МДБК, а ротавирусы – на перевиваемой культуре клеток почки поросенка СПЭВ по общепринятой методике, эшерихии и протей – на мясо-пептонном агаре (МПА).

Титрацию вирусов проводили микрометодом на чувствительной культуре клеток с использованием метода Рида и Менча, а концентрацию бактерий – путем сравнения со стандартом мутности.

Для изучения антигенной активности аттенуированных штаммов – компонентов инактивированной поливалентной вакцины против вирусной диареи, рота-, коронавирусной инфекции, эшерихиоза и протеоза «Энтеровак-5» исследования проведены на телятах.

Для оценки антигенной активности вирусных компонентов вакцины «Энтеровак-5» использованы 7 групп телят по 5 голов в группе. Телятам опытной группы № 1 вводили вирус диареи, инактивированный теотропином; опытной группы № 2 – вирус диареи, инактивированный формалином, опытной группы № 3 – ротавирус, инактивированный теотропином; опытной группы № 4 – ротавирус, инактивированный формалином, опытной группы № 5 – коронавирус, инактивированного теотропином; опытной группы № 6 – коронавируса, инактивированного формалином. Группа №7 – телятам вводили 1,0 мл изотонического раствора натрия хлорида. Вирусные антигены телятам вводились в объеме 1,0 мл двукратно с интервалом в 14 дней.

Для оценки антигенной активности бактериальных компонентов вакцины «Энтеровак-5» использованы 11 групп телят. Телятам опытной группы № 1 вводили суспензию E. coli – К88 ВГНКИ, инактивированную теотропином; опытной группы № 2 – суспензию E. coli – К88 ВГНКИ, инактивированную формалином, опытной группы № 3 – суспензию E. coli – K99 ВГНКИ, инактивированную теотропином; опытной группы № 4 – суспензию E. coli – K99 ВГНКИ, инактивированную формалином, опытной группы № 5 – суспензию E. coli – 987Р ВГНКИ инактивированную теотропином; опытной группы № 6 – суспензию E. coli – 987Р ВГНКИ, инактивированную формалином, опытной группы № 7 – суспензии E. coli – F41, А20 ВГНКИ инактивированную теотропином; опытной группы № 8 – суспензии E. coli – F41, А20 ВГНКИ, инактивированную формалином, опытной группы № 9 – суспензии E. coli – Pr.miracilis, инактивированную теотропином; опытной группы № 10 – суспензииPr.miracilis, инактивированную формалином, группа № 11 – телятам вводили 1,0 мл изотонического раствора натрия хлорида. Бактериальные антигены вводились в дозе 1,0 мл двукратно с интервалом в 14 дней.

У опытных животных кровь брали до введения вирусов и бактерий через 21 день после второго введения антигенов. В сыворотке крови определяли титр противовирусных антител в РНГА с использованием эритроцитарных диагностикумов с антигенами вирусов диареи, рота- и коронавирусов. Эритроцитарные диагностикумы с антигенами вышеуказанных вирусов для постановки реакции непрямой гемагглютинации представляет собой стабилизированные 0,3% глютаровым альдегидом эритроциты барана, сенсибилизированные антигенами вирусов с помощью конъюгирующих веществ – хлорида хрома с трипановым синим. Диагностикумы хранили в консерванте, представляющем собой фенолизированный изотонический раствор натрия хлорида с нормальной кроличьей сыворотки в течение 1 года с даты изготовления. Постановка и учет РНГА проводилась по общепринятой методике. Антибактеральные антитела изучали в РА с соответствующими инактивированными штаммами микроорганизмов.

Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием компьютерной программы Bio-Stat 2070.

В таблице 1 приведены результаты изучения антигенной активности аттенуированных штаммов вирусов ВД, рота- и коронавирусов на телятах.

Данные таблицы показывают, что введение телятам антигенов вирусов вируса в тест-дозе (1,0 мл) вызывает выработку противовирусных антител от 3,8 до 4,8 log2.

В табл. 2 представлены результаты изучения титров антибактериальных антител у телят при изучении антигенной активности инактивированных штаммов бактерий – E. Coli и Pr.miracilis.

В результате постановки РА титр антител у телят к эшерихиям, инактивированным формалином был 6,2-7,4 log2, титр антител в РА к Pr.miracilis, инактивированному формалином- 7,0, теотропином – 7,8 log2.

Таким образом, наиболее оптимальным средством инактивации вирусов и бактерий является теотропин и формалин, т.е. введение животным инактивированных данными препаратами вирусов и бактерий позволяет получить достаточно высокий титр противовирусных и антибактериальных антител – титр противовирусных антител достигает 4,8, антибактериальных – 8,0 log2.